eFASP样品前处理技术

北京生夏蛋白

Jan 5, 2022

核⼼试剂:
BT 表面活性剂 ,Trypsin蛋白酶,Lys C蛋白酶,PNGase F糖苷酶,Lipase脂肪酶

定量蛋⽩质组学和⽣物制药抗体抗体表征以及HCP研究的完整性取决于所使⽤的蛋⽩质提取、变性、酶解和多肽脱盐⽅法的重复性和回收率。常规变性剂,还原烷基化试剂及缓冲液的组合使⽤可以成功使蛋⽩⼤分⼦转变为多肽⼩分⼦⽤于LC-MS定性定量分析;然⽽,样品中含有的盐、核酸和脂类。

随后去除这些污染物和⼈为添加的变性剂(SDS,尿素,盐酸胍和还原试剂)的常规⽅法会导致⼤量PTM修饰肽损失,回收率低下和重复性差。这⾥介绍⼀种eFASP⽅法,该⽅法是基于质谱级表⾯活性剂和⽆盐蛋⽩酶⽽开发验证的。提⾼了灵敏度、回收率,多肽的覆盖率。速度快,⽅法标准化。